ELISA试剂盒实验过程需重点注意这些环节：
1. 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2. ELISA试剂盒实验?中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4. 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
5. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
6. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
7. 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
8. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
9. 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
10.按照ELISA试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
11.洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
12.底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

ELISA试剂盒操作指南：
固相包被→加待测样品→温育→洗涤+加酶标物→温育→洗涤→加底物→温育一加终止液→比色→判定结果。
1.试剂盒平衡：试剂盒中所有试剂和板条均应在试验前平衡至室温(约25℃)，一般需在室温放置20～30分钟以上。平衡时间太短会造成试剂混匀不够，样品孵育时间相对缩短，ELISA反应不够充分。冬季室温低，可将试剂盒置37℃温箱20分钟。
2.样品和试剂的混匀：稀释前、后的样品必须充分混匀，所有试剂在加样前也须摇匀，以保证试验的均一性。