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如何完善酶联免疫吸附测定试剂盒实验中的过失

人阅读 发布时间:2020-09-27 08:51

酶联免疫吸附测定试剂盒实验操作步骤多,新手操作难免会有过失。而这些过失很多是由细节不够好造成的,elisa试剂盒减少过失的方法有很多,比如做实验时少说话,防止唾液掉进酶标条中。当然,大家还要学会自己发掘问题,找出原因。

那么我们要如何完善elisa试剂盒实验中的过失?

1:评估试剂的实用性,试剂的稳定与否,对准确率的高低到头重要。在试剂启用前,应进行阴、阳对照及样品反复比照试验,判定试剂符合要求后方可使用。

2:操作前仔细阅读说明书,严格按照说明书要求进行规范化操作。不同批号的试剂不可混用。值得改进的地方,反复试验确定成立后才能改进,比如洗板次数的掌握等。

3:加样要准确、快速。加样不准确,酶生成物的量不能确定,直接影响显色结果。另外,显色的深浅及A值的测定与加入显色剂和终止液的量有关,所以加样应慎重。要求在一定时间内加样完毕的实验,如果加样迟缓,便出现误差,而且试剂长时间暴露在外,尤其室温过高时,保存期会缩短甚至失效。

4:检验技师应具备从事实验室操作的基本素质和实践经验。能熟练操作实验仪器、器械,具有一定总结和分析问题的能力,对实验中出现的意外情况能及时妥善解决。

5:洗涤彻底,洗板不彻底,酶结合物本底显色会呈现假阳性。另外,洗涤液要新鲜,现用现配,陈旧的洗涤液会出现本底增高现象,也可能出现假阳性。

6:elisa试剂盒严控反应时间。反应时间过长,酶失活;反应时间过短,酶结合物不能与血清中的微生物抗原抗体充分结合,生成物结构松散不牢固,容易洗掉,都可能造成假阴性。

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