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独家揭秘：elisa 试剂盒操作重点
人阅读 发布时间：2020-06-02 13:51
江西江蓝纯生物试剂有限公司为了让您愉快的心情更加愉悦点，特地独家揭秘我司 elisa 试剂盒的操作重点。
一、让竞争 ELISA 方法起到最佳作用
ELISA 试剂盒的英文名称是 ELISA KIT，它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自 70 年代初问世以来，发展十分迅速，目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。
可以利用竞争 ELISA 方法，在酶标板微孔上预包被抗 氟喹诺酮抗原。检测时，加入标准品或样品溶液，氟喹诺酮抗体及酶标记物，包被抗原和加入样本中的氟喹诺酮竞争性地与氟喹诺酮抗体结合后，再与酶标记物形成抗原抗体复合物，用 TMB 底物显色；加入反应终止液，在 450nm 波长酶标仪下进行检测，样品中的氟喹诺酮浓度与吸收光强度成反比。
二、冬季 ELISA 实验也要做保温
1. 为何要保温？
因为 ELISA 属固相免疫测定，抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。这是一个逐步平衡的过程，因此需经扩散才能达到反应的终点。
2. 保温的方式有哪些咧？
除有的 ELISA 仪器附有特制的电热块外，一般均采用水浴：
① 可将 ELISA 试板置于水浴箱中，ELISA 板底应贴着水面，使温度迅速平衡。
② 为避免蒸发，板上应加盖，也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔，此时可让反应板漂浮在水面上。
③ 若用保温箱，应放在湿盒内，湿盒要选用传热性良好的材料如金属等，在盒底垫湿的纱布，最后将 ELISA 板放在湿纱布上。
④ 湿盒应先放在保温箱中预温至规定的温度，特别是在气温较低的时候更应如此。
⑤ 无论是水浴还是湿盒温育，反应板均不宜叠放，以保证各板的温度都能迅速平衡。
⑥ 室温温育的反应，操作时的室温应严格限制在规定的范围内，标准室温温度是指 20～25℃，但具体操作时可根据说明书的要求控制温育。
⑦ 室温温育时，只要平置于操作台上即可。
⑧ 应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。
⑨ 为保证这一点，一个人操作时，一次不宜多于两块板同时测定。
三、实验中的回温平衡
在加样之前约半小时左右，把试剂盒从冰箱中取出，放置在室温下进行平衡，平衡到用手握住试剂瓶感觉到不凉为止。如果时间匆忙的话也可以利用手握住试剂瓶进行快速回温。
一、让竞争 ELISA 方法起到最佳作用
ELISA 试剂盒的英文名称是 ELISA KIT，它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自 70 年代初问世以来，发展十分迅速，目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。
可以利用竞争 ELISA 方法，在酶标板微孔上预包被抗 氟喹诺酮抗原。检测时，加入标准品或样品溶液，氟喹诺酮抗体及酶标记物，包被抗原和加入样本中的氟喹诺酮竞争性地与氟喹诺酮抗体结合后，再与酶标记物形成抗原抗体复合物，用 TMB 底物显色；加入反应终止液，在 450nm 波长酶标仪下进行检测，样品中的氟喹诺酮浓度与吸收光强度成反比。
二、冬季 ELISA 实验也要做保温
1. 为何要保温？
因为 ELISA 属固相免疫测定，抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。这是一个逐步平衡的过程，因此需经扩散才能达到反应的终点。
2. 保温的方式有哪些咧？
除有的 ELISA 仪器附有特制的电热块外，一般均采用水浴：
① 可将 ELISA 试板置于水浴箱中，ELISA 板底应贴着水面，使温度迅速平衡。
② 为避免蒸发，板上应加盖，也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔，此时可让反应板漂浮在水面上。
③ 若用保温箱，应放在湿盒内，湿盒要选用传热性良好的材料如金属等，在盒底垫湿的纱布，最后将 ELISA 板放在湿纱布上。
④ 湿盒应先放在保温箱中预温至规定的温度，特别是在气温较低的时候更应如此。
⑤ 无论是水浴还是湿盒温育，反应板均不宜叠放，以保证各板的温度都能迅速平衡。
⑥ 室温温育的反应，操作时的室温应严格限制在规定的范围内，标准室温温度是指 20～25℃，但具体操作时可根据说明书的要求控制温育。
⑦ 室温温育时，只要平置于操作台上即可。
⑧ 应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。
⑨ 为保证这一点，一个人操作时，一次不宜多于两块板同时测定。
三、实验中的回温平衡
在加样之前约半小时左右，把试剂盒从冰箱中取出，放置在室温下进行平衡，平衡到用手握住试剂瓶感觉到不凉为止。如果时间匆忙的话也可以利用手握住试剂瓶进行快速回温。
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