江西江蓝纯生物试剂有限公司

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独家揭秘:elisa试剂盒操作重点

发布时间:2020-01-10 10:58 |  点击次数:

江西江蓝纯生物试剂有限公司为了让您愉快的心情更加愉悦点,特地独家揭秘我司elisa试剂盒的操作重点。 

一、让竞争ELISA方法起到zui佳作用

ELISA试剂盒的英文名称是ELISA KIT,它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来,发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。

可以利用竞争ELISA方法,在酶标板微孔上预包被抗 氟喹诺酮抗原。检测时,加入标准品或样品溶液,氟喹诺酮抗体及酶标记物,包被抗原和加入样本中的氟喹诺酮竞争性地与氟喹诺酮抗体结合后,再与酶标记物形成抗原抗体复合物,用TMB底物显色;加入反应终止液,在450nm波长酶标仪下进行检测,样品中的氟喹诺酮浓度与吸收光强度成反比。

二、冬季ELISA实验也要做保温

1. 为何要保温?
因为ELISA属固相免疫测定,抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。这是一个逐步平衡的过程,因此需经扩散才能达到反应的终点。

2. 保温的方式有哪些咧?
除有的ELISA仪器附有特制的电热块外,一般均采用水浴:
① 可将ELISA试板置于水浴箱中,ELISA板底应贴着水面,使温度迅速平衡。
② 为避免蒸发,板上应加盖,也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔,此时可让反应板漂浮在水面上。
③ 若用保温箱,应放在湿盒内,湿盒要选用传热性良好的材料如金属等,在盒底垫湿的纱布,zui后将ELISA板放在湿纱布上。
④ 湿盒应先放在保温箱中预温至规定的温度,特别是在气温较低的时候更应如此。
⑤ 无论是水浴还是湿盒温育,反应板均不宜叠放,以保证各板的温度都能迅速平衡。
⑥ 室温温育的反应,操作时的室温应严格限制在规定的范围内,标准室温温度是指20~25℃,但具体操作时可根据说明书的要求控制温育。
⑦ 室温温育时,只要平置于操作台上即可。
⑧ 应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。
⑨ 为保证这一点,一个人操作时,一次不宜多于两块板同时测定。

三、实验中的回温平衡

在加样之前约半小时左右,把试剂盒从冰箱中取出,放置在室温下进行平衡,平衡到用手握住试剂瓶感觉到不凉为止。如果时间匆忙的话也可以利用手握住试剂瓶进行快速回温。